proces til ekstraktion af silymarin
Silymarin, en blanding af flavonolignaner, der udviser mange farmakologiske aktiviteter, opnås fra frugterne af mælketistel (Silybum marianum L. Gaertner). På grund af det høje lipidindhold i tidselfrugter anbefaler den europæiske farmakopé en to-trins proces til ekstraktion. For det første affedtes frugterne i 6 timer ved anvendelse af n-hexan; for det andet ekstraheres silymarin med methanol i yderligere 5 timer.
De præsenterede data viser, at denne ekstremt lange traditionelle Soxhlet-ekstraktionsproces kan afkortes til et par minutter ved hjælp af væskeekstraktion under tryk (PLE). PLE tillader også at fjerne det affedtningstrin, der kræves i den traditionelle procedure, hvilket forenkler silymarinekstraktionsproceduren og forhindrer silymarintab forårsaget af affedtning. PLE-genvindinger opnået under de optimerede ekstraktionsbetingelser er klart bedre end dem opnået ved den farmakopé-anbefalede Soxhlet-ekstraktionsprocedure.
PLE-udbytterne af silychristin, silydianin, silybin A, silybin B, isosilybin A og isosilybin B i acetone er henholdsvis 3,3, 6,9, 3,3, 5,1, 2,6 og 1,5 mg / g af de ikke-affedtede frugter. 5-timers Soxhlet-ekstraktion med methanol på affedtede frugter giver kun ~ 72% af silymarinmængden opnået i 10 min PLE ved 125 ° C.
Hvad er Silybum?
Silybum marianum L. Gaertner, almindeligvis kaldet sommælketistel, velsignet mælketistel, Marian Thistle, Mary Thistle eller Saint Mary' s Thistle, er en etårig eller halvårlig plante fra Asteraceae-familien. Planten, der oprindeligt voksede i Sydeuropa og Asien, findes nu overalt i verden (1). Denne generende ukrudt dyrkes i øjeblikket som en lægeplante og er en af de vigtigste medicinske afgrøder i Europa.
Mælketistel er blevet brugt til medicinske formål i over 2000 år, oftest til behandling af leversygdom (skrumpelever og hepatitis) såvel som til beskyttelse af leveren mod giftige stoffer (2–5). Nyere forskningsinteresse for denne plante er blevet stimuleret af undersøgelser, der viser dens usædvanligt høje antitumoraktivitet. Ekstrakter fra planten er nu under intensiv undersøgelse inden for eksperimentel kemoforebyggelse af kræft og til forbedring af kemoterapibivirkninger (6). Nylige rapporter har vist, at ekstrakter fra denne plante også er kendetegnet ved mange andre farmakologiske aktiviteter, såsom antiinflammatoriske og antifibrotiske virkninger (2, 7, 8).
Silymarin, en blanding af flavonolignaner, der udviser mange farmakologiske aktiviteter, fås fra frø af mælketistel (Silybum marianum L. Gaertner). De almindelige procedurer, der hidtil er anvendt til silymarinekstraktion, er hovedsageligt baseret på langsom opløsningsmiddelekstraktionsmetoder ved høj temperatur. Ulemperne forbundet med disse teknikker har ført til søgningen efter nye alternative ekstraktionsprocesser, der desuden kunne forbedresekstrakter af silymarinkvalitet. Sidstnævnte er især vigtigt med hensyn til anvendelse af silymarin. De opnåede silymarinekstrakter kunne faktisk indeholde giftige organiske rester, der skal fjernes for at imødekomme forbrugernes accept.
I forsøget på at forbedre processen med silymarinekstraktion og gøre den mere effektiv og miljøvenlig, for nylig mikrobølgestøttet opløsningsmiddelekstraktion, ultralydassisteret opløsningsmiddelekstraktion, væskeekstraktion under tryk, enzymassisteret ekstraktion, superkritisk væskeekstraktion og især subkritisk vandekstraktion også kendt som ekstraktionsmetoder under varmt vand er blevet udviklet og anvendt.
Materialer og metoder
Plantemateriale
Tørrede frugter af S. marianum L. Gaertner blev købt fra et lokalt apotek (Lublin, Polen) i efteråret 2011. En tilstrækkelig stor repræsentativ prøve af plantematerialet (ca. 500 g) blev formalet og sigtet for at opnå partikelstørrelsen på 0,4 mm. Nøjagtigt afvejede dele af materialet blev brugt til ekstraktioner.
Materialer og reagenser
Den standardiserede tørre ekstrakt af S. marianum L. Gaertner og silybin B (med en renhed på 98%), anvendt som standard, blev købt fra Sigma-Aldrich, Polen. Aceton, ethylacetat, phosphorsyre, n-hexan (alle af analytisk reagenskvalitet) og methanol (analytisk reagenskvalitet og HPLC-kvalitet) blev købt fra det polske kemiske anlæg (POCh, Gliwice, Polen). Vand blev oprenset ved anvendelse af et Milli-Q-system fra Millipore (Millipore, Bedford, MA, USA). Neutralglas, opnået som en gave fra det lokale glasværk (fraktion 0,4-0,6 mm), blev påført som et dispergeringsmiddel i PLE-cellen.
Ekstraktion under tryk væske
PLE blev udført med et Dionex ASE200-instrument (Dionex Corp., Sunnyvale, CA, USA). Plantematerialet (0,5 g) blev blandet med inaktivt materiale (neutralt glas) og anbragt i en 22 ml rustfrit stålekstraktionscelle indeholdende filterpapir i bunden. En anden cirkel med filterpapir blev placeret øverst i ekstraktionscellen. Endelig blev cellen lukket tæt og placeret i varmeovnen.
Indholdet af cellen blev ekstraheret ved et driftstryk på 60 bar. Ved afslutningen af processen blev den ekstraherede prøve skyllet under anvendelse af opløsningsmiddelvolumen svarende til 60% af ekstraktionscellens. Endelig blev prøven renset i 60 s under anvendelse af tryk nitrogen (150 psi), og ekstrakten blev opsamlet i et 60 ml hætteglas med en Teflon-belagt gummihætte. Volumenet af det opsamlede ekstrakt var mellem 25 og 31 ml afhængigt af ekstraktionscellens pakningstæthed. Den opnåede ekstrakt blev overført til en 50 ml målekolbe og fyldt op til dens volumen under anvendelse af en passende opløsningsmiddeltype. Tre uafhængige ekstraktioner blev udført under de samme betingelser. Mellem forsøgene blev systemet vasket med et passende ekstraktionsopløsningsmiddel.
PLE-parametre under undersøgelse var opløsningsmidletype (methanol, acetone og ethylacetat), temperatur (50, 75, 100, 125 og 150 ° C), tid (5, 10, 15 og 20 min) og antallet af ekstraktionscyklusser (1 –5). Til PLE-affedtningsprocessen blev der anvendt n-hexan som opløsningsmiddel, og parametre, der blev undersøgt, var temperatur (50 og 100 ° C) og tid (5 og 10 minutter) til fjernelse af lipider. Acetone- og ethylacetatekstrakter blev inddampet til tørhed under vakuum og genopløst i methanol før kromatografisk analyse.
Ekstraktion af Soxhlet
Udtømmende ekstraktioner i Soxhlet-apparatet blev udført under anvendelse af 2,0 g portioner af materialet. Præcis afvejede prøver blev overført til en papirbøsning. Den fyldte fingerbøl blev indsat i en 100 ml Soxhlet-ekstraktor. Ekstraktioner blev udført i totrinsprocessen (n=3). I det første trin i proceduren blev plantematerialet affedtet i 6 timer ved anvendelse af 75 ml n-hexan. I det andet blev silymarin ekstraheret i 5 timer med 75 ml methanol. Efter afkøling til stuetemperatur blev den opnåede ekstrakt overført til en 100 ml målekolbe, som derefter blev fyldt op til dens volumen med methanol. Tre uafhængige ekstraktioner blev udført.
Kromatografisk analyse af ekstrakter
HPLC-målinger blev udført på en Dionex Liquid Chromatograph (Dionex Corp.) bestående af en kromatografikabinet (LC20) indeholdende en PEEK-automatiseret injektionsventil udstyret med en 10 μL prøveløkke, en gradientpumpe (GP50), en absorbansdetektor (AD25) og en fotodiode-array-detektor (PDA100). Hele det kromatografiske system var under kontrol af PeakNet6 dataopsamlingssystemet. Kromatografiske separationer blev udført ved 40 ° C under anvendelse af en Prodigy ODS-2-søjle (5 um, 250 × 4,6 mm, ID) (Phenomenex, Torrance, CA, USA). Mobil fase A var en blanding af methanol med vandig phosphorsyreopløsning indeholdende 0,5 ml 75% phosphorsyre i 100 ml opløsning (35: 65, volumen / volumen). Mobil fase B var en blanding af methanol med den vandige phosphorsyreopløsning indeholdende 0,5 ml 75% phosphorsyre i 100 ml opløsning (50: 50, volumen / volumen). Strømningshastigheden var 0,8 ml / min. Analyserne blev udført i en mobil fasegradient med procentdelen af B i A varierende som følger: indledende koncentration, 0% B; 28 min, 100% B; 35 min, 100% B, 36 min 0% B. Før den næste analyse blev søjlen ækvilibreret ved anvendelse af den mobile fase indeholdende 0% B i 20 minutter. Hver ekstrakt blev HPLC-analyseret tre gange. Bølgelængden til påvisning af flavonolignaner blev indstillet til 288 nm, og UV-Vis-spektrene fra 210 til 500 nm blev også registreret til topkarakterisering.
Den kvalitative analyse af ekstrakterne blev udført ved at sammenligne tilbageholdelsestiderne for toppe og deres UV – Vis-spektre i ekstrakterne i forhold til dem fra den standardiserede tørre silymarinprøve. Til fremstilling af den standardiserede tørre silymarinopløsning blev en 0,02 g portion af prøven indeholdende 5,0 mg silybin A + B opløst i 50 ml methanol. Toppe for silychristin, silydianin, silybin A, silybin B, isosilybin A og B optrådte ved retentionstider på henholdsvis 15,1, 17,4, 27,5, 29,1, 33,6 og 34,8 min. Kvantitativ analyse var baseret på silybin B-standard, og ekstern standardmetode blev anvendt. En kalibreringskurve blev genereret fra fem koncentrationer af forbindelsen i koncentrationsområdet på 0,1-1,0 mg / ml. Tre målinger af topareal for hver koncentration af standardopløsningen blev udført. De karakteristiske parametre for den opnåede kalibreringskurve var som følger: hældning, 0,516 og aflytning, 0,003. Kalibreringskurven viste sig at være lineær i det testede koncentrationsområde. Korrelationskoefficienten viste sig at være> 0,995. På grund af vanskeligheden ved at købe silychristin-, silydianin-, silybin A-, isosilybin A- og B-standarder blev mængderne af disse forbindelser beregnet ved at relatere deres kromatografiske reaktioner til kalibreringskurven for silybin B.
Statistisk analyse
Alle data udtrykkes som gennemsnit ± standardafvigelse (SD). Analysen af varians (ANOVA) og F-test blev brugt til at vurdere indflydelsen af PLE-betingelser på silymarinudbytte. Middelværdierne blev betragtet som signifikante forskellige, når resultatet af sammenlignede parametre var forskelligt på P=0,05 signifikansniveau. For at kontrollere betydningen af hver Fisher-koefficient blev P-værdierne anvendt.
Resultater
Figur 1a viser typisk kromatogram af PLE-ekstrakt opnået fra frugterne af S. marianum L. Gaertner, hvorimod figur 1b viser kromatogrammet for silymarinekstraktion fra mælketistelopløsning fremstillet ved opløsning af det standardiserede tørre ekstrakt af S. marianum L. Gaertner i methanol (1 mg / ml). Analysen af kromatogrammer af PLE- eller Soxhlet-ekstrakter med den til standardiseret opløsning (retentionstider, UV – Vis-spektre og peak purity index) viste, at de anvendte kromatografiske betingelser muliggør en tilstrækkelig opløsning af de undersøgte forbindelser, toppe nummereret fra 1 til 6, fra prøvematrixkomponenter. Toppe blev identificeret som: (1) silychristin, (2) silydianin, (3) silybin A, (4) silybin B, (5) isosilybin A og (6) isosilybin B, henholdsvis.
Hvordan udtrækkes mælketistel?
I modsætning til de fleste urter, ekstraherer mælketistelfrø ikke meget godt i vand, så prøv ikke at lave en kop te ud af dem! Spis i stedet de friske formalede frø eller få en kapsel af god kvalitet. Hvis du bruger frøene, skal du købe dem hele og derefter male dem efter behov (jeg bruger en kaffekværn til at gøre dem til et groft pulver). Frøene smager fedtet, sødt og bittert på én gang - måske er de en erhvervet smag, men de er slet ikke ubehagelige. Start med at tage 1/2 til 1 spsk om dagen drysset på din mad og se, hvordan det føles for dig, og juster den mængde, som du har brug for.
ingredienser
1 kop lunkent vand
1 kop 100 bevis alkohol Jeg bruger vodka
¾ til 1 kop mælketistelfrø formalet, hvis det er muligt
Instruktioner
Steriliser den anvendte Mason-krukke ved at placere den i kogende vand i ca. 10 minutter eller ved at placere den på stativet i ovnen ved ca. 250 grader i 15 minutter.
Hæld alle ingredienserne i en Mason-krukke.
Læg et nyt låg på krukken, og skru det fast med en ring.
Ryst krukken kraftigt i ca. 1 minut.
Sæt krukken et køligt mørkt sted i fem uger.
Ryst krukken dagligt for at sikre, at mælketistelfrøene ikke flyder til toppen og bliver fuldt infunderet med alkohol og vand.
Ved afslutningen af det angivne antal uger, sil mælketistlen væk fra væsken gennem en finmasket sil - hold væsken. Hvis du ikke har en finmasket sil, skal du bruge en lille dørslag og / eller beklæde en dørslag med flere kaffefiltre for at mindske størrelsen af åbningerne.
Hvor længe varer mælke tidsel for at træde i kraft?
Mælketistelfrø kan beskytte leverceller fra giftige kemikalier og stoffer. Det ser ud til at have blodsukkersænkende, antioxidant og antiinflammatoriske virkninger.
Forbedring af oxidative stressparametre blev konsekvent noteret efter seks måneder' behandlingsvarighed med et specialiseret leveringssystem for mælketistel (2). Forbedring af oxidative stressmønstre er ansvarlig for forbedret insulinsignalering og levercellens funktion.
Hvor lang tid skal det tage mælketidsel? (Mælketidsel DOSERING)
Mælketistel betragtes som sikkert i doser på 420 mg / dag oralt i opdelte doser i op til 41 måneder. En kilde antyder daglige doser på 12 til 15 g tørre frugter til dyspepsi og lidelser i galdesystemet, mens et ekstrakt, der indeholder 200 til 400 mg / dag silymarin, betragtes som effektivt ved forskellige leversygdomme.
Fordele ved mælketistel
1. Understøtter leverens sundhed
En af de mest almindelige anvendelser af mælketistel er at behandle leverproblemer. En 2016-undersøgelse viste, at mælketistel forbedrede diætinduceret leverskade hos mus. Flere beviser er nødvendige for at bevise, at mælketistel gavner menneskelige lever på samme måde, men forskere teoretiserer, at det gør det. Den aktive ingrediens i mælketistel, silymarin, fungerer som en antioxidant ved at reducere produktionen af frie radikaler. Forskere mener, at dette skaber en afgiftende virkning, hvorfor det er mælketistel, der kan være gavnligt for leverproblemer.
Indtil mere forskning er udført, anbefales dog ikke mælketistel som den primære behandlingsmulighed for leverproblemer. Men det kan være en nyttig supplerende behandling at prøve.
2. Fremmer hudens sundhed
Marietidselolie kan bruges topisk for at forbedre hudens sundhed.
Mælketistel kan hjælpe med at fremme sund hud. En undersøgelse fra 2015 viste, at mælketistel hjalp med at forbedre inflammatoriske hudtilstande, når de påføres musens hud.
Mælketistel viste sig også at have antioxidant- og anti-aldringseffekter på humane hudceller i et laboratoriemiljø i en anden undersøgelse.
Yderligere forskning på mennesker er nødvendig for at identificere, hvilke fordele en person kan forvente ved at påføre mælketistel på huden.
3. Reducerer kolesterol
Højt kolesteroltal kan føre til problemer med hjertesundheden og øge en persons chance for slagtilfælde.
En undersøgelse fra 2006 tyder på, at mælketistel kan spille en vigtig rolle ved at holde kolesterolniveauer nede. Det fandt ud af, at kolesterolniveauerne var lavere hos mennesker, der tog mælketistel til behandling af diabetes end dem, der fik placebo.
4. Understøtter vægttab
Indledende dyreforsøg udført i 2016 viste, at silymarin forårsagede vægttab hos mus, der blev fodret med en diæt beregnet til at forårsage vægtøgning.
Dette antyder, at mælketistel kan være gavnligt for dem, der ønsker at tabe sig. Mere forskning i virkningerne af mælketistel på vægttab hos mennesker er nødvendig for at bekræfte dette.
5. Reducerer insulinresistens
En undersøgelse af mus fandt, at mælke tidselekstrakt hjalp med at reducere insulinresistens. Insulinresistens er et problem for mennesker med type 2-diabetes.
Selv om denne forskning antyder, at mælke tidsel kan spille en rolle i diabetesstyring, er der behov for mere forskning for at bekræfte, om mælketidsel reducerer insulinresistens og understøtter diabetesstyring.
6. Forbedrer allergiske astmasymptomer
Den aktive ingrediens i mælketistel kan hjælpe med at reducere betændelse. En undersøgelse fra 2012 viste, at silymarin hjalp med at beskytte mod betændelse i luftvejene hos mus med allergisk astma.
Mere forskning er nødvendig for at se, om silymarin gavner astmasymptomer hos mennesker.
7. Begrænser spredning af kræft
Mælketistel kan hjælpe med at stoppe spredningen af visse typer kræft. En gennemgang fra 2016 viste, at mælke tidsel ekstrakt hæmmede væksten af kræftceller i kolorektal kræft.
Mere forskning er nødvendig for at bestemme, hvordan mælketistel kan bruges til at bekæmpe kræft.
8. Understøtter knoglesundhed
Melketidsel te kan hjælpe med at forhindre knogletab forårsaget af mangel på østrogen. Mælketistel kan spille en vigtig rolle i at støtte knoglesundheden. En undersøgelse fra 2013 viste, at mælketistel hjalp med at forhindre knogletab. Undersøgelsen kiggede specifikt på knogletab forårsaget af mangel på østrogen. Det er endnu ikke klart, om mælketistel er lige så gavnlig for knogletab med en anden årsag. Yderligere undersøgelser er nødvendige, før det er sikkert at konkludere, at mælketistel understøtter knoglesundhed hos mennesker.
9. Forbedrer kognition
En undersøgelse fra 2015 viste, at mælketistel øgede modstandsdygtigheden over for oxidativt stress. Oxidativ stress er en mulig årsag til Alzheimers sygdom.
På denne måde kan mælketistel hjælpe med at forbedre kognition og behandle degenerative tilstande, der påvirker sindet. Mere forskning på mennesker er nødvendig for at bekræfte virkningen af mælketistel på kognition.
10. Øger immunforsvaret
Mælketistel kan hjælpe med at styrke en persons' s immunrespons og hjælpe dem med at bekæmpe infektion.
En 2016-undersøgelse af en dyremodel viste, at mælketistelekstrakt forbedrede immuniteten, når den indtages. En ældre undersøgelse viste, at mælke tidsel ekstrakt havde en positiv effekt på immunrespons hos mennesker.
Flere undersøgelser med menneskelige deltagere er nødvendige, før forskere med sikkerhed kan sige, at mælketistel øger en persons immunsystem.
Mælke tidsel bivirkninger
Mælketistel ser ud til at have få bivirkninger, selv når de tages i flere år. Nogle mennesker har kvalme, diarré, kløe og oppustethed.
For bulk mælketistelpulver, kontakt os venligst påherbext@undersun.com.cn
Referencer: https: //academic.oup.com/chromsci/article/53/2/366/307144
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B9780128093801000152
https://www.cambridgenaturals.com/blog/milk-thistle-food-for-the-liver
https://www.survivalsullivan.com/milk-thistle-extract/
https://www.webmd.com/digestive-disorders/milk-thistle-benefits-and-side-effects
https://www.medicalnewstoday.com/articles/320362#how-to-use-milk-thistle
